ВОЛОСЫ

Сборник научных работ “Судебно-медицинская служба на рубеже веков”, Киров, 2001, с.177-182.

ВОЛОСЫ КАК ОБЪЕКТ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ.

И.Ю. Смирнова, С.С. Катаев, В.Н. Коротун

(Пермское областное бюро судебно-медицинской экспертизы. Нач. – В.И. Перминов)

Судебно-химическое исследование биожидкостей живых лиц на наркотические и лекарственные вещества (НЛВ) позволяет получить положительный результат не позднее 1-2 (реже 3-4) суток после их последнего приема и отражает лишь текущий процесс выведения этих веществ, а в случае смерти- лишь констатировать факт употребления наркотиков, либо причину смерти. В тоже время, судебно-следственным органам нередко следует решить ряд вопросов и установить:

неоднократность (систематичность) употребления НЛВ;
динамику наркотизации и временной интервал (длительность) приема НЛВ;
факты употребления НЛВ, если оно носит эпизодический характер и не выявляется исследованием биожидкостей на текущий момент;
является ли данное лицо потребителем НЛВ или контактером (лицом, контактирующим с нарковеществами в процессе из производства, фасовки или сбыта).

Решить эти и ряд других вопросов позволяет судебно-химическое исследование волос. Первое упоминание о накоплении барбитуратов в волосах относится к 1954 г. Однако, только с середины 80-х годов возрос интерес к исследованию волос на НЛВ, что обусловлено широким распространением высокочувствительной аппаратуры, в частности – хромато-масс-спектрометров (ГХ/МС), позволяющим надежно идентифицировать вещества на нано- и пикограммовых уровнях.

В России исследования волос на НЛВ начали проводиться с 90-х годов. В Пермском областном бюро судебно-медицинской экспертизы исследование волос вошло в практику в 1998 году, и за 2 года был накоплен значительный научный и практический опыт его использования. Результаты исследования волос (чаще на наркотические вещества – опиаты, каннабиноиды, кокаин и др.) позволили органам правопорядка решать перечисленные выше вопросы. Правовое решение вопроса исследования волос на наркотические вещества в настоящее время недостаточно проработано и требует законодательного закрепления [3].

Для исследования волос использовали кислотный гидролиз [1], экстракцию горячим метанолом [4] и их модифицированные варианты, а так же щелочной гидролиз при анализе волос на каннабиноиды [2], в таблице 1 приведены основные этапы исследования волос на наиболее распространенные наркотические вещества (алкалоиды опия, каннабиноиды) указанными методами.

Таблица 1.

	*Морфин, кодеин*	*Морфин, кодеин,* *6-МАМ, героин*	*Тетрагидроканнабинол, каннабинол.***
Отмывка	5 раз отмывка этанолом порциями по 1 мл, затем водой, высушивание	3-4 раза отмывка этанолом по 5 мин. на ультразвуковой бане, высушивание	3-4 раза отмывка этанолом по 5 мин. на ультразвуковой бане, высушивание
Деструкция	Измельчение с битым стеклом в ступке	Измельчение с битым стеклом в ступке	Измельчение с битым стеклом в ступке
Гидролиз	1 мл 6 н НСl, гидролиз 45 мин. при 80^оС, затем охлаждение и добавление 1мл воды, фильтрация	-	1 мл 50% водного раствора NaOH, гидролиз 25 мин. при комн. температуре, затем разбавление 1мл воды, фильтрация
Очистка	2 мл хлороформа	-	2 мл хлороформа*
Экстракция	Доведение рН до 10 с использованием 25% раствора NH₄OH, двукратно порциями по 2 мл смеси хлороформ-н-бутанол (9:1), органические фазы объединяются и упариваются.	2 мл метанола при 60^оС в течение 2-х часов, фильтрация, упаривание	Доведение рН до 2 с использованием концентрированной НСl, двукратно порциями по 2 мл смеси гексан-этилацетет (7:1), органические фазы объединяются и упариваются.
Дериватизация	По 100 мкл уксусного ангидрида и пиридина, 60^оС в течении 20 мин.	150 мкл трифторуксусного ангидрида, 60^оС в течение 20 мин.	По 100 мкл безводного ацетона, метилиодида и 2 мг К₂CO₃, 60^оС^-40 мин.
Реконструкция	100 мкл метиленхлорида	50 мкл метиленхлорида или б/в этилацетата	100 мкл этанола
Идентификация ГХ/МС	Ацетилкодеин, диацетилморфин	Трифторацетильные производные морфина, кодеина, 6-МАМ, героин	Метильные производные ТГК, КНБ, 11-нор-9-карбокси-ТГК

* Данная стадия должна быть исключена, так как приводит к высоким потерям каннабиноидов (прим. Автора, ноябрь 2001 г.).

Хромато-масс-спектрометрическое исследование проводили на оборудовании фирмы "Хьюллет-Паккард", хроматограф НР5890 серия II, масс-селективный детектор НР5972А, капиллярная кварцевая колонка НР-5MS длинной 30 м и диаметром 0,25 мкм. Температура колонки - программируемая 2 минуты при 70^оС, затем нагрев термостата со скоростью 20 ^оС/мин до 270^оС и выдержка при конечной температуре 8 минут. Режим работы детектора SCAN (45-550) или SIM (на определяемые группы веществ). Типичные навески волос для исследования 30-100 мг. В таблице 2 приведены основные характеристические ионы, их соотношение, время удерживания и индексы удерживания для часто встречающихся наркотических веществ.

Таблица 2.

Соединение	М.м.	Характеристические ионы, m/z*						t_уд.аб_{., мин}	RI
Ацетилкодеин	341	341	282	342	229	204	283	13,60	2612
Диацетилморфин	369	327	369	268	310	204	215	14,53	2738
Морфин ди-ТФА	477	364	477	365	380	311	458	12,14	2332
Кодеин ТФА	395	282	395	396	283	266	225	12,41	2393
6-МАМ ТФА	423	264	423	204	311	69	365	12,72	2452
ТГК метил-	328	313	328	285	314	257	329	12,57	2423
КНБ метил-	324	309	310	324	238	252	209	12,90	2490
КНД диметил-	342	287	342	223	213	288	261	13,08	2522
ТГК-к-та диметил-	372	313	357	372	314	358	341	14,88	2779

* подчеркнуты ионы, используемые в режиме SIM (прим. Автора, ноябрь 2001 г.).

Использование в методе кислотного гидролиза стадии экстракции гидролизата волос при рН 2 позволяет расширить круг определяемых веществ и, помимо морфина, кодеина и других веществ основного характера (кетамин, эфедрин и др.), проводить обнаружение барбитуратов и продуктов гидролиза карбомазепина. Наиболее универсальным является метод экстракции горячим метанолом, позволяющий извлекать большинство накапливающихся в волосах НЛВ без их разрушения, включая такие соединения как 6-моноацетилморфин (6-МАМ), героин, кокаин, бензоилэкгонин, производные 1,4-бензодиазепина и ряда других веществ. Недостатком метода является большое количество соэкстрактивных соединений, что может потребовать использования реэкстракции кислых и основных веществ.

Получение метильных производных в процессе дериватизации для каннабиноидов и других соединений кислой фракции выгодно отличается от ацетилирования и получения трифторацетильных производных набором характеристических ионов (в отличие от первых) и большей устойчивостью (в отличии от вторых), а так же меньшим влиянием на хроматографическую систему, что свойственно силильным производным.

Использование трифторуксусного ангидрида в методе экстракции горячим метанолом позволяет идентифицировать потребителей героина как по нативному соединению, так и по его метаболиту 6-МАМ, в случае же применения уксусного ангидрида данная интерпретация является невозможной. Исследование смывов с волос на наркотические соединения дает возможность дифференцировать потребителей и контактеров.

Актуальность дальнейшей разработки новых методов исследования волос на НЛВ очевидна. Волосы являются интересным информативным объектом судебной химии, и исследования их оказывают значительную практическую помощь как в работе судебно-медицинских экспертов, так и в оперативно - следственных мероприятиях органов правопорядка.

Анализ наркотических средств. Еремин С.К., Изотов Б.Н., Веселовская Н.В., М.: Мысль, 1993, 272 С.

Катаев С.С., Смирнова И.Ю.// Сборник “Актуальные аспекты судебной медицины”, Выпуск V, Ижевск: Экспертиза, 1999, с.165-168.
Крюков В.Н., Мелентьев А.Б., Новиков П.И.// Суд.-мед. Эксперт. 1999, №3, с.18-20.
Определение опийных алкалоидов, героина и кокаина в биообъектах. Методические рекомендации. Камаев А.В., Алексеев М.Г., Симонов Е.А. и др., М., ЭКЦ МВД России, 1997, 16 С.

КОММЕНТАРИЙ

К сожалению, с момента отправки до момента выхода в свет минуло полтора года. И надо прямо сказать, что все методики доработаны и претерпели некоторые изменения. Хотя, суть первых двух методов (кислотного гидролиза и экстракции метанолом) остались прежними. Ряд изменений связан с расширением веществ, на которые проводиться определение, то есть своего рода скрининг. Единственное, что можно сказать с уверенностью, они не позволяют проводить определение в волосах каннабиноидов. По поводу методики определения каннабиноидов накопилось много замечаний: количество стекла для измельчения должно быть минимально возможным (либо без измельчения, мелко нарезанные волосы обрабатываются щелочью), следует избегать процессов фильтрации (лучше центрифугировать и декантировать с осадка), ни в коем случае не следует проводить экстракционную очистку она ведет к большим потерям каннабиноидов. И вообще, как показала жизнь, каннабиноиды лучше (и легче) определять в моче…

Катаев Сергей

mailto: forenschemist@narod.ru

На первую страницу